Seroloģiskie testi: veidi, lietošana

Laboratory diagnoze no praktiski visām infekcijas slimībām ir balstīta uz atklātu asins pacienta antivielu, kas tiek ražoti ar patogēnu antigēnu, seroloģisko metodēm. Viņi iegāja ārsta praksē vēlu deviņpadsmitajā - divdesmitā gadsimta sākumā.

Zinātnes attīstība ir palīdzējis noteikt antigēnu struktūru mikrobu un ķīmisko formulām to toksīniem. Ir iespējams izveidot ne tikai ārstniecisko, bet arī diagnostikas serumu. Tos iegūst, novājinātas patogēni, laboratorijas dzīvnieku ārstēšanai. Pēc vairāku dienu mērcēšanas asins trušus vai peles sagatavoti produkti, ko izmanto, lai identificētu baktērijas vai to toksīnus, izmantojot seroloģisko testu.

Ārēja izpausme šīs reakcijas atkarīgs no apstākļiem, tā formulēšanas un stāvokli antigēniem pacienta asinīm. Ja mikrobi ir nešķīstošu daļiņu, tie atrisināt, šķīdināts, imobilizēts vai saistoša serumā. Ja antigēni ir šķīstošs, izrādās, parādību neitralizācijas vai izgulsnēšanās.

aglutinācija (PA)

Seroloģiskās aglutinācijas tests ir ļoti specifisks. Tas ir viegli veikt, un ir diezgan skaidrs, lai ātri atklātu antigēnu pacientu serumā. To izmanto, nosakot Vidal reakciju (diagnoze vēdertīfs un paratīfi) un WEIGL (tīfu).

Tas ir balstīts uz specifiska mijiedarbība starp cilvēka antivielas (vai aglutīnu) un mikrobu šūnu (agglyutenogenami). Pēc to mijiedarbību veidojas daļiņas, kas nogulsnēm. Tā ir pozitīva zīme. Par nosakot reakciju var izmantot dzīvs vai miris mikrobu aģenti, sēnītēm, vienšūņiem, asins šūnas un somatiskās šūnas.

Ķīmiskā reakcija ir sadalīts divos posmos:

1. Specifiskās antivielas savienojums (AT) ar antigēniem (Ag).
2. Nespecifiski - nosēdumi konglomerātu AG-AT, ti veidošanos aglutinējošs.

Reakcija netiešā salipināšana (TPHA)

Šī reakcija ir vairāk jūtīgs nekā iepriekšējā. To lieto, lai diagnosticētu slimību, ko izraisa baktērijas, intracelulāro parazītiem, vienšūņiem. Tas ir tik specifisks, kas var atklāt pat ļoti zemu koncentrāciju antivielas.

Par to formulēt, izmantojot attīrītu aitas sarkanās asins šūnas un sarkano asins šūnu, kas cilvēka ārstētiem ar antivielām vai antigēniem (tas ir atkarīgs no tā, ko laboratorija vēlas atrast). Dažos gadījumos, cilvēka sarkanās asins šūnas ārstēti ar imūnglobulīnu. Seroloģiskā atbilde eritrocītu tiek uzskatīts par derīgu, ja nokrišņu tās notika apakšā caurules. Pozitīvā reakcija, mēs varam teikt, kad šūnas ir izvietotas formā apgrieztu lietussargu, kas aizņem visu dibenu. Negatīvā reakcija ieguva, kad sarkano asins šūnu apmesties formā kolonnā vai pogas centrā apakšā.

nogulsnēšana reakcija (RP)

Seroloģiskie reakcijas šāda veida kalpo, lai identificētu ārkārtīgi sīkas antigēniem. Tas var būt, piemēram, olbaltumvielām (vai to daļas), compounds of proteīnus ar lipīdu vai ogļhidrātu, kas ir daļa no baktērijām un to toksīniem.

Sera, lai reakcija tiek iegūts ar mākslīgo invāzijas dzīvnieku, parasti trušiem. Ar šo metodi, jūs varat saņemt absolūti provocējošo serumu. Inscenējums seroloģisko nokrišņu līdzīgs iedarbības uz aglutināciju. Ietvertie seruma saistīties ar antigēniem, antivielas koloidālā šķīdumā , lai veidotu lielu proteīnu molekulas, kas tiek uzklāti uz mēģenes apakšā vai uz pamatnes (gēla). Šī metode tiek uzskatīta par ļoti specifisks un var atklāt pat nelielu vielas.

Izmanto, lai diagnosticētu mēri, tularemia, Anthrax, meningītu un citām slimībām. iesaistītas arī kriminālistikas pārbaudi.

Gel nokrišņi tests

Seroloģiskie testi var veikt ne tikai šķidrā vidē, bet agarozes gelu. To sauc izkliedētu nostādināšanas metodi. Ar to, pētīt sastāvu sarežģītu antigēna maisījumiem. Šī metode ir balstīta uz chemotaxis antigēnu uz antivielu, un otrādi. Želeja viņi pāriet uz otru ar dažādu ātrumu un tikšanās, lai veidotu nokrišņu līnijas. Katra līnija - viens komplekts K-AT.

Neitralizācija eksotoksīni antitoksīns (RN)

Antitoksisks serums spēj neitralizēt eksotoksīni darbību, kas mikroorganismi sekrēciju. Pamatojoties uz šiem datiem un seroloģiskiem testiem. Mikrobioloģija izmanto šo metodi, lai titrēšanai Sera, toksīnu un toksoīdiem, kā arī to terapeitisko darbību. No neitralizācijas toksīna stiprums tiek noteikts ar parasto vienībām - AE.

Turklāt, pateicoties šīs reakcijas var noteikt sugas vai veidus, kas pieder eksotoksīni. To izmanto diagnostikā stingumkrampjiem, difteriju, botulismu. Pētījumu var veikt "uz stikla", un ar želeju.

līzes reakcija (RL)

Imūnā serums, kas nonāk organismā no pacienta, ir, neatkarīgi no tā galvenā funkcija pasīvā imunitāte, pat un lytic īpašības. Tā spēj izšķīdinot mikrobu aģenti, šūnu un ārējie elementi vīrusu iekļūšanu organismā pacientam. Atkarībā specifiku antivielu iekļauti bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins un citu seruma izolēta.

Šīs specifiskās antivielas sauc par "papildinājums". Tas ir atrodams gandrīz visos ķermeņa šķidrumos, tas ir sarežģīts olbaltumvielu struktūra un ir ļoti jutīgi pret temperatūras pieaugumu, sakrata, skābju un tiešas saules gaismas. Bet sausā veidā spēj saglabāt savas lytic īpašības līdz pat sešiem mēnešiem.

Ir daži seroloģisko testu šāda veida veidi:

- bacteriolysis;

- hemolīze.

Bacteriolysis tiek veikta, izmantojot pacienta asins serumu un specifisku imūno serumu dzīviem mikrobiem. Ja, tad pētnieks redz līzi par baktērijām, un atbilde tiks uzskatīts par pietiekamu skaitu pozitīvā papildus ir klāt asinīs.

Otrais asinis seroloģisko atbilde ir tāda, ka suspensija eritrocītu apstrādāts pacientu serumā, kas satur hemolysins, kas tiek aktivizēti tikai klātbūtnē konkrēta komplimentu. Ja ir viens, tad laboratorijas skatoties izšķīšanu sarkano asins šūnu. Šī reakcija ir plaši izmanto mūsdienu medicīnā, lai noteiktu titru papildinājums (ti, tās mazākā summa, provocējot līzi sarkano asins šūnu), asins serumā un ražošanai komplementa saistīšanas analīzi. Tas bija šādā veidā veica seroloģiskā reakcija uz sifilisu - Wasserman.

komplementu fiksācijas (RSK)

Šī reakcija tiek izmantota, lai noteiktu seruma antivielas pacientam uz infekcijas aģenta, kā arī lai noteiktu, ka iniciators ir tās antigēnu struktūru.

Līdz šim punktam esam aprakstījuši vienkāršu seroloģisko testu. RAC uzskata par grūti reakciju, jo tas mijiedarbojas ne divi, bet trīs elementus: antivielu, antigēnu un papildināt. Tās būtība ir fakts, ka mijiedarbība starp antivielu un antigēnu notiek tikai klātbūtnē olbaltumvielu komplimentu, kas adsorbēti uz virsmas veido kompleksu K-AT.

Paši antigēniem pēc pievienojot papildinājumu, ievērojot būtiskas izmaiņas, kas norāda uz reakcijas kvalitāti. Tas var būt līze, hemolīze, imobilizācijai, baktericīda vai bakteriostatisku efektu.

Pati reakcija notiek divos posmos;

1. Antivielu-antigēnu, kas nav vizuāli pamanāmas pētnieku veidošanos.
2. antigēnu saskaņā ar darbības papildina maiņa. Šis posms parasti var izsekot ar neapbruņotu aci. Ja vizuālā reakcija nav redzama, tad izmantojiet papildu rādītāju sistēmu, kas ļauj atklāt izmaiņas.

rādītāju sistēma

Šī reakcija ir balstīta uz saistošo papildina. The test tubes stundu pēc tam nosakot RSK pievienotās attīrītu aitas eritrocītu un seruma hemolītisko kas nesatur komplementu. Ja caurule ir atstāta nesaistīto papildinājums, tas pievienosies sarežģītu N-AT veidojas starp aitas asins šūnu un hemolizīna, un izraisīt to izšķīšanu. Tas nozīmētu, ka ĢPP ir negatīvs. Ja sarkanās asins šūnas palika neskarts, tad, attiecīgi, reakcija ir pozitīva.

hemagglutination (RHA)

Ir divi būtiski atšķirīgi hemaglutinācijas. Viens no tiem - seroloģiskā, tas tiek izmantots, lai noteiktu asins grupu. Tādā gadījumā eritrocīti mijiedarbojas ar antivielām.

Un otrs reakcija nav saistīts ar seroloģisko, jo sarkano asins šūnu reaģē ar hemaglutinīna ražo vīrusi. Tā kā katrs Ierosinātāja darbojas tikai konkrētos eritrocītiem (vistas, aitas, pērtiķiem), mēs varam pieņemt, ka šī reakcija šauri specifiskas.

Skaidrs pozitīva vai negatīva atbilde, tas ir iespējams, lai atrašanās vietu asins šūnu apakšā caurules. Ja tie skaitlis līdzinās apgrieztā jumta, tad vēlamais vīruss ir sastopams pacienta asinīm. Un, ja visi sarkanās asins šūnas veidojas monēta kolonnas, nav nezināmas patogēni.

Reakcija hemagglutination inhibīcijas (HAI)

Šis ļoti specifisku reakciju, kas ļauj izveidot formu, vīrusa tipa vai klātbūtni specifisko antivielu serumā no pacienta asinīm.

Tās būtība slēpjas faktā, ka pievienotie caurule, kas satur testa materiālu antivielu, novērš nosēdumu antigēniem uz eritrocītiem, tādējādi apturot hemaglutinācijas. Tas ir kvalitatīva norāde klātbūtnē specifisku antigēnu asinīs ar konkrētu vēlamo vīrusu.

Reakcija imūnfluorescences (RIF)

Reakcija ir balstīta uz spēju identificēt kompleksus ar AT-AH dienasgaismas mikroskopu pēc ārstēšanas flyuorohromnymi krāsvielas. Šī metode ir vienkārši lietojams, nav nepieciešama izolāciju tīrkultūru un aizņem maz laika. Tā ir vajadzīga, lai ātri noteiktu diagnozi infekcijas slimībām.

Praksē šie seroloģiskie testi ir sadalīti divās kategorijās: tiešo un netiešo.

Direct RIF ražots antigēnu, kas iepriekš apstrādāta ar fluorescējošu serumu. Un Netiešais ir tas, ka zāles tiek vispirms apstrādā ar parasto diagnosticum kas satur antivielas līdz vēlamajam antigēnu un pēc tam atkārtoti piemēro dienasgaismas sūkalas, kas ir specifiski proteīnu kompleksu K-AT, un mikrobu šūnas kļūst redzams ar mikroskopiju.